温度梯度程序的设置方法可能因不同的PCR仪器和软件而有所差异,但大体步骤如下:
打开PCR仪器 并确保其处于关闭状态,然后按下电源按钮以打开PCR仪器,等待仪器完成启动过程。选择“温度梯度”模式:
在控制面板上查找并选择“温度梯度”模式,这通常可以通过在菜单中浏览或按相应的按钮来完成。
设置PCR程序参数:
在设置温度梯度之前,需要设置PCR程序的其他参数,例如循环次数、每个循环的时间和扩增目标等。这些参数可以根据您的实验需求进行设置。
进入温度梯度设置界面:
在控制面板上查找并选择“温度梯度设置”选项。这通常可以在控制面板上找到相应的按钮或菜单选项。
设置梯度范围和梯度步长
梯度范围:
是指在PCR管或板的不同位置设置不同的温度范围。您可以根据需要设置梯度范围,通常为一段温度范围,例如50°C至70°C。
梯度步长:是指每个位置之间的温度差异,您可以根据需要设置步长,通常为1°C至5°C。
确认设置并启动PCR程序 :设置完梯度范围和步长后,确认设置并启动PCR程序。仪器将按照您设置的温度梯度进行PCR反应,您可以在实验过程中监控PCR反应的进行。
示例程序编辑
进入程序编辑模式:
按`New`进入,设置程序名,然后按`ENTER`键两次确认程序名。
输入热盖温度和反应体系:
输入热盖温度和反应体系多少,然后按`ENTER`键进入主程序体的设计。
编辑常规PCR程序
选择`TEMP`,按`ENTER`确认,输入温度参数,然后按`ENTER`确认;输入孵育时间,然后按`ENTER`确认。
选择`OPTION`中的`INC`、`EXT`、`RAMP`和`BEEP`,根据需要进行设置。
编辑温度梯度功能
选择`GRADIENT`功能,根据系统提示在`LOWER TEMP`输入最低温度(例如55℃),然后按`ENTER`确认。
系统提示输入`HIGHER TEMP`,输入最高温度(例如65℃),然后按`ENTER`确认。
插入循环体
选择`GOTO`语句,按`ENTER`确认,输入循环体第一步的语句序号,然后按`ENTER`确认。
输入增加的循环次数(例如循环30次就输入29),然后按`ENTER`确认。
确认并启动程序:
检查所有设置无误后,按`END`结束程序编辑,然后启动PCR程序。
请根据您的具体PCR仪器和软件版本调整上述步骤。如果在设置过程中遇到问题,建议参考仪器的用户手册或联系技术支持获取帮助。